Kikhoste Mikrobiologisk diagnostikk Ingeborg S. Aaberge Avdeling for infeksjoner som smitter via luftveiene Divisjon for smittevern Nasjonalt folkehelseinstitutt
Kikhoste Bordetella pertussis første gang isolert i 1906 Bakterien har en rekke forskjellige antigener betydning for virulens, individuell immunrespons og serologisk diagnostikk noen er spesifikke for B. pertussis, andre viser kryssreaksjon med andre bakterier Vaksine inngår i barnevaksinasjonsprogrammet: Helcellevaksine innført i i 1952 Acellulær kikhostevaksine fra 1998
Kikhoste Kikhostesmitte kan medføre alvorlig sykdom hos uvaksinerte småbarn Mistanke om kikhoste vekkes ofte sent i forløp av sykdom Smittereservoir hos vaksinerte større barn og voksne Aktiv og god kikhostediagnostikk er viktig for å forebygge smitte
Mikrobiologisk diagnostikk Dyrkning Nukleinsyrepåvisning (PCR) Antistoffer i serum Ingen diagnostisk gullstandard. Valg av diagnostisk metode avhenger bl.a. av hvor lenge pasienten har vært syk når prøven taes
Dyrkning av Bordetella pertussis Prøvemateriale: Penselprøve fra nasopharynx ikke bomullspensel, prøven taes gjennom nesen Må bruke adekvat transportmedium ikke nedkjøling av prøven Pasientens alder, antimikrobiell behandling og vaksinasjonsstatus påvirker følsomhet ved dyrkning Dyrkning er særlig aktuell når prøve taes tidlig i sykdomsforløp
PCR påvisning av B. pertussis Prøvemateriale: Nasopharynxpensel NB! Bruk Dacronpensel Prøvetransport: buffer/ saltvann /transportmedium Utstyrs og kompetansekrevende metode Falske resultater hemning i prøven kontaminering i laboratoriet
PCR påvisning av B. pertussis Høy spesifisitet når anbefalte retningslinjer for PCR brukes Følsom metode Rask diagnostikk
Sammenligning dyrkning og PCR Ullevål Universitetssykehus 381 pasienter 1991-2001 Modifisert etter Holberg-Petersen M et al. In publication
Dyrkning versus PCR for diagnostikk Prøver som er agens positive Prøve tatt < 2 uker etter sykdomsdebut: 22% bare påvist med PCR Prøve tatt 2-4 uker etter sykdomsdebut: 37% bare påvist med PCR Prøve tatt > 4 uker etter sykdomsdebut: 60% bare påvist med PCR Ullevål Universitetssykehus og Folkehelseinstituttet 1999-2001. Holberg-Pedersen et al. in publication
Kikhoste - Antistoffer i serum Ca. 80% av kikhoste diagnostiseres serologisk Kikhoste kan diagnostiseres serologisk først minst 2 uker etter sykdomsdebut Forskjellige testsystem er tilgjengelig de fleste basert på ELISA teknikk kombinerer ulike antigener forskjellig betydning av ulike immunglobulin klasser komplisert tolkning av resultater
Serologisk diagnostikk - prøvetaking Serumprøve Optimal prøvetaking: -”0 prøve” tatt før 2 ukers sykdomsvarighet - Oppfølgingsprøve 1-2 uker senere Alternativ prøvetaking: - En prøve tatt mer enn 3 uker etter sykdomsdebut
Kikhosteantigener Pertussis toksin (PT) spesifikt for B. Pertussis de fleste danner antistoff mot PT, men eldre kan ha svakere respons Filamentøst hemagglutinin (FHA) kryssreaksjon med andre bakterier, f. eks. B. parapertussis og Haemophilus influenzae >90% danner antistoff mot PT og FHA ved kikhosteinfeksjon
Kikhosteantigener forts. Pertactin inngår i enkelte acellulære kikhoste vaksiner lite egnet som antigen i diagnostisk sammenheng Fimbrier Lipooligosakkarid 30-60% danner antistoff mot disse antigenene ved kikhosteinfeksjon
Serologisk kikhoste diagnostikk Immunglobulinklasser Spesifikke IgG antistoffer viktigst i diagnostikken Spesifikke IgA antistoffer assosiert med aktuell infeksjon, vanligvis falt til lavt nivå 4 måneder etter sykdom små barn danner ikke alltid IgA antistoffer Spesifikke IgM antistoffer kan bestå lenge etter infeksjon, mindre egnet som mål for aktuell infeksjon
Serologisk diagnostikk av kikhoste Tidspunkt for prøvetaking Alder på pasient Vaksinasjonsstatus Betydning for vurdering av resultat Kliniske opplysninger er viktig ved innsending av prøve Det mikrobiologiske laboratoriet vurderer serologiske resultater opp mot kliniske opplysninger og kan da evt. konkludere med sikker eller sannsynlig infeksjon
Oppsummering Valg av metode til diagnostikk i forhold til sykdomsvarighet av kikhoste
Oppsummering Nasopharynxprøve til agenspåvisning Riktig type pensel og transport Prøve til agenspåvisning aktuelt < 4 ukers sykdom PCR er mer følsom enn dyrkning
Oppsummering forts. Serumpar optimalt for serologisk diagnostikk Diagnosen kan i en del tilfelle stilles serologisk på enkeltprøve tatt sent i forløp Komplisert tolkning av serologisk resultat - Kliniske opplysninger er nødvendig