Presentasjon lastes. Vennligst vent

Presentasjon lastes. Vennligst vent

Diagnostikk av Limb Girdle The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen 27.10.05.

Liknende presentasjoner


Presentasjon om: "Diagnostikk av Limb Girdle The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen 27.10.05."— Utskrift av presentasjonen:

1 Diagnostikk av Limb Girdle The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen

2 Muskelbiopsi •Åpen biopsimetode –Mer materiale, flere muligheter –God kvalitet, korrekt diagnose

3 Det skjæres ca. 30 snitt i ulike nivå…. •H&E •Gomori trichrome •ATP ( ) •NADH •Sur phosfatase •Non-spesifikk esterase •PAS •Oil-red O •MHC1 •Ev. Metabolsk –Cox/SDH –PFK –AMP –Myophos

4 Restmaterialet fryses til biobank •Dystrofin •Alfa-dystroglycan •Alfa-sarcoglycan •Beta-dystroglycan •Beta-sarcoglycan •Delta-sarcoglycan •Gamma-sarcoglycan •Dysferlin •Spectrin •Merosin (to ulike) •Emerin

5 Hvike grupper muskelsykdommer? •Muskel dystrofier •Kongenitte myopatier •Inflammatoriske myopatier •Metabolske myopatier •Sykdommer som skyldes defekt i den nevromuskulære forbindelsen (motorisk endeplate) •Nevrogene muskelsykdommer

6 Membranproteiner i muskelcellen (Dystrofin-relaterte proteiner ) •Cytoskjelett forbindelser •Forbindelse mellom myofibriller og sarcolemma •Ved Z-linjene og M-linjene

7 Dystrofin-relaterte proteiner

8 Immunhistokjemi - dystrofin •Normal •Duchenne •Bærer

9 Immunhistokjemisk analyse •Dystrofin •Alfa-dystroglycan •Alfa-sarcoglycan •Beta-dystroglycan •Beta-sarcoglycan •Delta-sarcoglycan •Gamma- sarcoglycan •Dysferlin •Spectrin •Merosin (80 and 300) •Emerin

10 Western blot •Dystrophin •Calpain •Dysferlin •Merosin •Caveolin

11 Resultat (siden 1994) •Alfa-sarcoglycan (adhalin) •Beta- dystroglycan •Beta-sarcoglycan •Delta- sarcoglycan •Gamma- sarcoglycan •Spectrin

12 Calpain LG 2A Siden 1998 •Western blot: –88 Normal bands –10 pasienter med totalt manglende bånd – 17 pasienter med svake calpain bånd •DNA analyser: –4 pasienter med calpain mutasjon

13 CURRENT CLASSIFICATION OF LGMD Bushby and Beckmann, 2003 DISEASEGENE LOCUSGENE PRODUCTMW (kDa) LOCALISATION LGMD2A15q15 (1995)Calpain 394 LGMD2B2p13 (1994)Dysferlin230Membrane LGMD2C13q12 (1992)α- sarcoglycan35Transmembrane LGMD2D17q11-q12β-sarcoglycan50Transmembrane LGMD2E4q12 (1995)γ-sarcoglycan43Transmembrane LGMD2F5q33-34(1996) δ-sarcoglycan35Transmembrane LGMD2G17q11-q12 (1997) Telethonin19Sarcomeric LGMD2H9q31 (1998)TRIM3272 LGMD2I19q13 (2001)FKRP LGMD2J 2q Titin 4200 Sarcomeric

14 Grunnlag for å gjøre FKRP DNA analyse for FKRP fra pasienter med: •Biopsier med svakt eller manglende calpain bånd •Biopsier med partiell merosin ekspresjon •Biopsier med manglende alfa-dystroglykan •Biopsier med uavklarte primære muskelsykdommer •Biopsier med uavklarte inflammatoriske myopatier

15 Konklusjon: Pr •36 pasienter med fukitin relatert protein (FKRP) mutasjon 826C > A) i Norge (analysert ved Medisinsk genetikk, UNN Tromsø) –3 compound heterozygous (2 familier) Heterozygous –33 homozygote fra 28 familier –Fra alle regioner i Norge

16 Pasientene •Klinikk: – år –Lett til moderat forhøyet CK –Svær variasjon I klinisk bilde (fenotype) –fra et tidlig hurtig progredierende (Duchenne-like) –Voksen- langsom progredierende limb-girdle phenotype •Muskel biopsi •Diffuse non-spesifikke myopati forandringer •Nevrogene forandringer •Inflammatoriske funn •Metabolske funn

17 abnorm expresjon av α-Dystroglycan α - Dys

18 Inflammatoriske funn •Nekrotiske fibre •Mononukleær betennelses infiltrat •Positiv MHC1 farging

19 Klassifikasjon av kongenitte muskeldystrofier (MDCS) Guppe II •Abnormal glycosylation of α-dystroglycan –Fukuyama MDC –Muscle-eye-brain- disease –MDC 1C/LGMD 2I –Walker-Warburg- syndrome –Others rare forms MDC1A FCMD MEB FKRP/MDC1C MDC1B WWS Intergrin-α7 Deficiency DMD Ullrich CMD

20 Konklusjon Pasienter med lenge pågående kronisk muskelsykdom:. Bruk nasjonalt muskelregister ! •Gjør immunfarging for: – α- Dystroglycan – α2 Laminin – Western blot for Calpain 3 •Så •Overvei DNA analyse for FKRP


Laste ned ppt "Diagnostikk av Limb Girdle The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen 27.10.05."

Liknende presentasjoner


Annonser fra Google