Laste ned presentasjonen
1
Diagnostikk av Limb Girdle
The long and winding road.. S. Lindal Fagkonferansen
2
Muskelbiopsi Åpen biopsimetode Mer materiale, flere muligheter
God kvalitet , korrekt diagnose
3
Det skjæres ca. 30 snitt i ulike nivå….
H&E Gomori trichrome ATP ( ) NADH Sur phosfatase Non-spesifikk esterase PAS Oil-red O MHC1 Ev. Metabolsk Cox/SDH PFK AMP Myophos
4
Restmaterialet fryses til biobank
Dystrofin Alfa-dystroglycan Alfa-sarcoglycan Beta-dystroglycan Beta-sarcoglycan Delta-sarcoglycan Gamma-sarcoglycan Dysferlin Spectrin Merosin (to ulike) Emerin
5
Hvike grupper muskelsykdommer?
Muskel dystrofier Kongenitte myopatier Inflammatoriske myopatier Metabolske myopatier Sykdommer som skyldes defekt i den nevromuskulære forbindelsen (motorisk endeplate) Nevrogene muskelsykdommer
6
Membranproteiner i muskelcellen (Dystrofin-relaterte proteiner)
Cytoskjelett forbindelser Forbindelse mellom myofibriller og sarcolemma Ved Z-linjene og M-linjene
7
Dystrofin-relaterte proteiner
8
Immunhistokjemi - dystrofin
Normal Duchenne Bærer
9
Immunhistokjemisk analyse
Dystrofin Alfa-dystroglycan Alfa-sarcoglycan Beta-dystroglycan Beta-sarcoglycan Delta-sarcoglycan Gamma-sarcoglycan Dysferlin Spectrin Merosin (80 and 300) Emerin
10
Western blot Dystrophin Calpain Dysferlin Merosin Caveolin
11
Resultat (siden 1994) Alfa-sarcoglycan (adhalin) Beta-dystroglycan
Beta-sarcoglycan Delta-sarcoglycan Gamma-sarcoglycan Spectrin
12
Calpain LG 2A Siden 1998 Western blot: DNA analyser: 88 Normal bands
10 pasienter med totalt manglende bånd 17 pasienter med svake calpain bånd DNA analyser: 4 pasienter med calpain mutasjon
13
CURRENT CLASSIFICATION OF LGMD Bushby and Beckmann, 2003
DISEASE GENE LOCUS GENE PRODUCT MW (kDa) LOCALISATION LGMD2A 15q15 (1995) Calpain 3 94 LGMD2B 2p13 (1994) Dysferlin Membrane LGMD2C 13q12 (1992) α- sarcoglycan 35 Transmembrane LGMD2D 17q11-q12 β-sarcoglycan 50 Transmembrane LGMD2E 4q12 (1995) γ-sarcoglycan 43 Transmembrane LGMD2F 5q33-34(1996) δ-sarcoglycan 35 Transmembrane LGMD2G 17q11-q12 (1997) Telethonin 19 Sarcomeric LGMD2H 9q31 (1998) TRIM32 72 LGMD2I 19q13 (2001) FKRP LGMD2J q Titin Sarcomeric
14
Grunnlag for å gjøre FKRP
DNA analyse for FKRP fra pasienter med: Biopsier med svakt eller manglende calpain bånd Biopsier med partiell merosin ekspresjon Biopsier med manglende alfa-dystroglykan Biopsier med uavklarte primære muskelsykdommer Biopsier med uavklarte inflammatoriske myopatier
15
Konklusjon: Pr 36 pasienter med fukitin relatert protein (FKRP) mutasjon 826C > A) i Norge (analysert ved Medisinsk genetikk, UNN Tromsø) 3 compound heterozygous (2 familier) Heterozygous 33 homozygote fra 28 familier Fra alle regioner i Norge
16
Pasientene Klinikk: Muskel biopsi 10- 52 år
Lett til moderat forhøyet CK Svær variasjon I klinisk bilde (fenotype) fra et tidlig hurtig progredierende (Duchenne-like) Voksen- langsom progredierende limb-girdle phenotype Muskel biopsi Diffuse non-spesifikke myopati forandringer Nevrogene forandringer Inflammatoriske funn Metabolske funn
17
abnorm expresjon av α-Dystroglycan
18
Inflammatoriske funn Nekrotiske fibre
Mononukleær betennelses infiltrat Positiv MHC1 farging
19
Klassifikasjon av kongenitte muskeldystrofier (MDCS)
Ullrich CMD Guppe II Abnormal glycosylation of α-dystroglycan Fukuyama MDC Muscle-eye-brain-disease MDC 1C/LGMD 2I Walker-Warburg-syndrome Others rare forms MDC1A FCMD MEB FKRP/MDC1C MDC1B WWS Intergrin-α7 Deficiency DMD
20
Konklusjon Så Overvei DNA analyse for FKRP
Pasienter med lenge pågående kronisk muskelsykdom: . Bruk nasjonalt muskelregister ! Gjør immunfarging for: α- Dystroglycan α2 Laminin Western blot for Calpain 3 Så Overvei DNA analyse for FKRP
Liknende presentasjoner
© 2024 SlidePlayer.no Inc.
All rights reserved.